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紫外分析儀的原理以及校準(zhǔn)的重要性說明

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紫外分析儀采用不同波長(zhǎng)的紫外光對(duì)DNA、RNA電泳凝膠樣品進(jìn)行觀察拍照、檢測(cè)蛋白質(zhì)、核甘酸,也可以同時(shí)發(fā)出長(zhǎng)波紫外線、短波紫外線和可見光三種波長(zhǎng)的光輻射。紫外分析儀適用于核酸電泳、熒光的分析、檢測(cè),PCR產(chǎn)物檢測(cè),DNA指紋圖譜分析,紙層分析,薄層分析,是開展RFLP研究,RAPD產(chǎn)物分析的理想儀器。
 
工作原理:
 
普通處于基態(tài)的物質(zhì)分子受到激發(fā)光(即紫外線)照射后,吸收了激發(fā)的能量,物質(zhì)分子處于激發(fā)狀態(tài)。激發(fā)態(tài)分子的能量一部分消耗于振動(dòng),于是分子處于振動(dòng)能級(jí),從振動(dòng)能級(jí)回到基態(tài)時(shí)多余的能量依其它的形式放出來即為熒光,而不同物質(zhì)能發(fā)出不同波長(zhǎng)的熒光,人們可以根據(jù)不同光色的熒光和熒光的強(qiáng)弱來判斷不同的物質(zhì)和含量多少,這就是熒光分析。
 
紫外分析儀校準(zhǔn)的重要性:
 
1、根據(jù)調(diào)查統(tǒng)計(jì),絕大多數(shù)廠商生產(chǎn)的紫外分析儀技術(shù)指標(biāo)中都規(guī)定紫外線波長(zhǎng)為254nm和365nm(或者其他紫外波長(zhǎng))。紫外分析儀主要應(yīng)用于熒光物質(zhì)的檢測(cè),通過查閱相關(guān)熒光物質(zhì)測(cè)量的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),都規(guī)定了使用設(shè)備和波長(zhǎng),波長(zhǎng)的偏差直接影響結(jié)果的判定。因此波長(zhǎng)應(yīng)作為一個(gè)重要的指標(biāo)校準(zhǔn)。
 
2、紫外燈強(qiáng)度隨使用時(shí)間的增加而衰減,而紫外輻射照度值的衰減決定了用戶是否需要更換燈,因此此項(xiàng)校準(zhǔn)十分必要。
 
3、燈的穩(wěn)定性作為一個(gè)重要的技術(shù)指標(biāo)直接影響到用戶對(duì)樣品的檢測(cè)結(jié)果,因此,燈的穩(wěn)定性測(cè)量應(yīng)作為校準(zhǔn)項(xiàng)目。
 

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